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abcam抗體鑒定
日期:2025-05-01 19:34
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摘要:
abcam抗體鑒定
熒光抗體在使用前應加以鑒定。鑒定指醫學標記包括效價及熒光素與蛋白質的結合比率。抗體效價可以用瓊脂雙擴散法進行滴定,效價大於1:16者較為理想。熒光素與蛋白質結合比率(F/P)的測定和計算的基本方法是:將製備的熒光抗體稀釋至A2801≈1.0,分別測讀A280 (蛋白質特異吸收峰)和標記熒光素的特異吸收峰,按公式計算。
熒光抗體在使用前應加以鑒定。鑒定指醫學標記包括效價及熒光素與蛋白質的結合比率。抗體效價可以用瓊脂雙擴散法進行滴定,效價大於1:16者較為理想。熒光素與蛋白質結合比率(F/P)的測定和計算的基本方法是:將製備的熒光抗體稀釋至A2801≈1.0,分別測讀A280 (蛋白質特異吸收峰)和標記熒光素的特異吸收峰,按公式計算。
F/P值越高,說明抗體分子上結合的熒光素越多,反之則越少。一般用於固定標本的熒光抗體以F/P=1.5為宜,用於活細胞染色的以F/P=2.4為宜。
(abcam抗體)抗體工作濃度的確定方法類似ELISA間接法中酶標抗體的滴定。將熒光抗體自1:4~1:256倍比稀釋,對切片標本作熒光抗體染色。以能清晰顯示特異熒光、且非特異染色弱的*高稀釋度為熒光抗體工作濃度。

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